小心培養(yǎng)的細(xì)胞就這樣死掉了，是個(gè)很心痛的事情。其實(shí)影響細(xì)胞存活率的原因有很多，有時(shí)候并不是培養(yǎng)箱本身出了問(wèn)題，我們的許多操作對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果也是有很大影響的，今天為大家分享一下使用CO2光照培養(yǎng)箱對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)應(yīng)該注意的問(wèn)題：

　　1.確保所有實(shí)驗(yàn)室材料都無(wú)菌

　　交叉污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。即使是輕微的污染，也可能毀了幾個(gè)星期的成果。因培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕，真菌易生長(zhǎng)，因此須注意定期清潔。此外，在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺(tái)之前，應(yīng)用酒精擦拭干凈，以避免污染。

　　2.小心處理您的培養(yǎng)物

　　細(xì)胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強(qiáng)調(diào)也不為過(guò)。劇烈搖晃，或連續(xù)的溫度波動(dòng)可能會(huì)對(duì)生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的，溫度均一，且遠(yuǎn)離電動(dòng)儀器。此外，盡量避免一次處理多個(gè)細(xì)胞系，因?yàn)樗赡軙?huì)影響細(xì)胞的基因型和表型。您還應(yīng)定期完成STR圖譜分析，以確認(rèn)細(xì)胞系的身份。

　　3.在使用前正確解凍細(xì)胞

　　盡管解凍看起來(lái)是個(gè)簡(jiǎn)單的步驟，但須操作得當(dāng)，以免傷害細(xì)胞。長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫條件下會(huì)使細(xì)胞無(wú)法鋪板。因此，凍存管應(yīng)當(dāng)在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培養(yǎng)基稀釋，以避免造成直接傷害。

　　4.使用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞

　　細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程共有3個(gè)階段：停滯期、對(duì)數(shù)期和平臺(tái)期，分別代表了低細(xì)胞生長(zhǎng)、高細(xì)胞生長(zhǎng)和無(wú)細(xì)胞生長(zhǎng)。有活力的細(xì)胞是健康的，快速分裂的，在對(duì)數(shù)期以70-80%的匯合度存在。

　　5.利用細(xì)胞的代謝特性來(lái)優(yōu)化培養(yǎng)基

　　分析使用過(guò)的培養(yǎng)基，有助于鑒定必要成分的代謝速率，包括氨基酸和維生素。從細(xì)胞生長(zhǎng)階段和蛋白生產(chǎn)階段收集到的動(dòng)態(tài)代謝圖譜可用來(lái)平衡基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加培養(yǎng)基，指導(dǎo)培養(yǎng)基的重點(diǎn)，有助于蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。

　　此外，在使用CO2光照培養(yǎng)箱的過(guò)程中應(yīng)關(guān)好培養(yǎng)箱的門，以免氣體外泄，影響試驗(yàn)效果，制冷系統(tǒng)停止工作后，用軟布擦凈工作腔和玻璃觀察窗；每次停機(jī)前，各控制開(kāi)關(guān)均應(yīng)處于非工作狀態(tài)才切斷電源，只有做好這些小細(xì)節(jié)，才能成功的做好實(shí)驗(yàn)！